对数期 ,OD=0.4-0.6
如果你用的是37℃摇的话,那么这个OD有点老了,这样做出来的感受态转化效率会低些,但是只是转质粒的话还是没问题的。
在这个温度下,OD=0.4-0.5左右,是大肠杆菌刚进入对数期,这个时候的大肠杆菌菌体状态稳定,用来制作感受态,效率会比较高。
当然会。低于0.3细菌都没正式进入对数期,细菌状态不好,且菌量少,转化效率基本上不会高。
一般来讲长到OD600:0.5-0.6,或者是OD600:0.3.大概要六到七个小时左右。这是制备感受态细胞的常用的时间点。
不能。酵母是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞,培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便,其中感受态od值超过了能不用。
下面以大肠杆菌TG1电转感受态为例给你演示一下:第一天,上午取大肠杆菌TG1菌液划线平板(一般要48小时以上才能长出单克隆 )第三天,在长有单克隆的平板上挑一个生长状态好的单克隆接到4ML新鲜培养基,过夜培养 第四天,如你说的,按1:100扩大培养;OD达到0.5-0.6开始制备感受态细胞 制备好的...
2.5………是0.25吧?一开始扩大培养时,细菌的增殖速度还是很慢的,等它到对数期时,即大概OD0.4开始,细菌就会快速增长,大概1小时就能到0.6。不过你37℃摇菌做感受态的话,在OD0.4左右做是最好的。
用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞,常用于成批制备感受态细菌。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。1.从37℃培养16~20h的新鲜平板中挑取一个单菌落(如大肠杆菌DH52),或1ml新鲜的16~20h过夜培养物,转到一个含有100mlLB培养基的1L或500ml烧瓶中。于37℃...
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